Molekylær diagnose tilsvarer et sett med molekylære teknikker som har som mål å identifisere endringer i DNA som kan være et tegn på genetiske sykdommer eller kreft, for eksempel. I tillegg blir molekylære teknikker mye brukt for å identifisere og bekrefte smittsomme sykdommer, da de representerer en raskere og mer nøyaktig diagnosemetode.
Molekylær diagnose er kostbar, og blir derfor ikke bedt om veldig ofte av leger, men gir nøyaktige resultater med hensyn til forandringens tilstedeværelse, måten den kan forstyrre organismenes funksjon og pasientens respons på behandling.
Hva er det for
Molekylær diagnose kan utføres med flere mål, de viktigste er:
- Identifisering av leukemirelaterte mutasjoner, for eksempel identifisering av BCR-ABL-translokasjon, som er karakteristisk for kronisk myeloid leukemi (CML); Karakteristiske mutasjoner av hematologiske sykdommer, for eksempel arvelig hemokromatose, polycythemia vera, essensiell trombocytemi og trombofili, for eksempel Molekylære forandringer som indikerer forekomst av kreft, for eksempel kolorektal-, lunge-, bryst- og hjernekreft, for eksempel; Diagnostisering av smittsomme sykdommer, som hepatitt, uretritt, toksoplasmose, leishmaniasis, etc., i tillegg til identifisering av HPV-viruset.
Til tross for at molekylær diagnose er ansett som kostbar sammenlignet med andre diagnostiske teknikker, er den mer nøyaktig, ettersom den er i stand til å informere om endringen relatert til en viss sykdom og graden av innflytelse av denne endringen i kroppen, og dermed hjelpe personens behandling.
I tillegg til å bli brukt til diagnose av forskjellige sykdommer, brukes molekylære teknikker også for å vurdere responsen på behandling, spesielt hos personer med kreft, og er en av de mest effektive metodene for å indikere progresjon og tilbakefall av sykdommer.
Hvordan det gjøres
Den molekylære diagnosen kan utføres med en hvilken som helst prøve, og legen etterspør den som best kan gi informasjon om pasientens tilstand, som kan være urin, spytt eller, i de fleste tilfeller, blod. Det er ikke behov for faste eller andre forberedelser til eksamen.
Prøven blir samlet og sendt til laboratoriet sammen med legens veiledning for å informere om undersøkelse eller type forskning som bør gjøres. Den utførte molekylteknikken avhenger av den forespurte undersøkelsen og innebærer en rekke presise prosedyrer som tar sikte på å identifisere tilstedeværelsen eller fraværet av endringen som legen har bedt om.
Vanligvis brukes bare en liten mengde tilsendt prøve, resten lagres slik at om nødvendig eksamen blir gjentatt.
Se hva som er de viktigste molekylære teknikkene
PCR
PCR, forkortelse for Polymerase Chain Reaction eller Polymerase Chain Reaction , er en molekylær teknikk som består av å forsterke et fragment av genetisk materiale, enten DNA eller RNA, med det formål å identifisere mutasjoner og dermed hjelpe til med diagnostisering av sykdommer.
Denne teknikken er laget av ekstraksjon og rensing av det genetiske materialet, som deretter blir plassert i en blanding der en av komponentene er et restriksjonsenzym som varierer i henhold til den forespurte undersøkelsen og hvis funksjon er å skjære materialet i fragmenter slik at mulig genetisk endring kan identifiseres. Blandingen plasseres i en termosykler, som er en enhet som virker gjennom temperaturvariasjonen som er indikert av fagpersonen i henhold til eksamen, og dermed tillater amplifisering av det genetiske fragmentet. I tilfelle av konvensjonell PCR blir PCR-produktet etter amplifisering utsatt for elektroforese, som er en molekylær teknikk basert på vekten og størrelsen på fragmentene, det vil si at i henhold til disse egenskapene genereres et båndmønster, hvis analyse er utført basert på det positive kontrollbåndet, det vil si båndet kjent for å samsvare med den genetiske endringen.
PCR i sanntid, også kalt qPCR, er en type kvantitativ PCR, det vil si at den i tillegg til å identifisere den genetiske endringen, kan gi informasjon om genuttrykk, det vil si hvor mye det forandrede genet som kommer til uttrykk i organismen. Dermed kan den brukes til å hjelpe diagnosen og overvåke behandlingen. PCR i sanntid krever ikke elektroforese, hele prosessen med å forsterke og analysere genetisk materiale gjøres av et apparat, og resultatet tolkes av en utdannet helsepersonell.
sekvense
Sekvensering er en molekylær teknikk som består i å bestemme sekvensen til DNA-nukleotider, som er de dannende enhetene til genetisk materiale. Sekvensering skjer fra en reaksjon som ligner på PCR, men i amplifiseringsblandingen tilsettes modifiserte nukleotider ved tilsetning av fluorokromer, som når materialet amplifiseres, blir de modifiserte nukleotidene inkorporert i DNA og genererer flere fragmenter, som tilsvarer sekvenseringsproduktet.
Reaksjonsproduktet plasseres i en anordning kalt DNA-sekvenser, der, når fragmentene nås med utstyrets laser, blir fluorokromene eksiterte og avgir fluorescens, som er indikert av utstyret ved hjelp av topper, med hver topp tilsvarende til et nukleotid. På slutten av reaksjonen vil utstyret informere DNA-sekvensen, og dermed være i stand til å hjelpe legen i diagnosen genetiske sykdommer.
